На пути к лучшему пониманию взаимодействия Lactobacillus rhamnosus GG и организма хозяина

Статья в формате PDF.

Lactobacillus rhamnosus GG (LGG^®) ATCC 53103 впервые были выделены учеными Sherwood Gorbach и Barry Goldin из фекалий здорового взрослого человека (название бактерии образовано из первых букв их фамилий – ​GG). Бактерию идентифицировали как потенциальный пробиотический штамм в связи с ее устойчивостью к воздействию соляной кислоты и желчи, хорошими показателями роста, высокой адгезивной способностью к эпителию тонкого кишечника. На сегодняшний день LGG^® представляет собой один из наиболее изученных пробиотических штаммов. Преимущества применения этого штамма тщательно изучались в клинических и интервенционных исследованиях с участием людей.
В этой статье мы представляем обзор последних достижений в области молекулярных знаний о взаимодействии LGG^® и организма хозяина, которые позволят лучше понять влияние этого пробиотического штамма на здоровье человека.

Клинические преимущества Lactobacillus rhamnosus GG (LGG^®) 
Благоприятное влияние на состояние желудочно-кишечного тракта у детей и взрослых
Ранее было доказано, что LGG^® колонизирует кишечник новорожденных детей значительно лучше, чем взрослых. Оказывается, пренатальный прием LGG^® (1,8×10¹⁰ КОЕ в капсулах ежедневно с 36-й не­дели гестации) изменяет состав мик­робиоты новорожденных, способствуя формированию полезной микрофлоры с доминированием бифидобактерий, несмотря на то что общее микробное многообразие достоверно не изменялось. Другие авторы установили, что постнатальный прием LGG^® (10⁹ КОЕ/сут, лиофилизированный порошок, смешанный с грудным молоком), по-видимому, влияет на характер колонизации тонкого кишечника новорожденных, способствуя появлению значительного видового разнообразия по сравнению с плацебо; однако более детальный анализ не проводился. Вопрос, как именно LGG^® может способствовать колонизации бифидобактерий in vivo, требует дальнейшего изу­чения.
Благодаря своим превосходным адгезивным свойствам LGG^® часто используется в качестве пробиотика – ​кандидата для профилактики и лечения гастроинтестинальных инфекционных заболеваний, диареи, хотя его эффективность доказана не в равной мере. Три последующих метаанализа рассматривали целесообразность применения LGG^® в лечении острой диареи у детей. Имеющиеся в настоящее время данные подтверждают, что LGG^® может уменьшать длительность диареи на 1,05 дня, в частности, у детей, проживающих в Европе и принимающих высокие дозы этого пробиотика (≥1010 КОЕ/сут). LGG^® (10⁹ КОЕ/сут в ферментированном молочном продукте) также может уменьшать риск развития приобретенной нозокомиальной гастроинтестинальной инфекции у госпитализированных детей при ежедневном приеме. У перуанских детей с пониженным питанием отмечена низкая распространенность диареи на фоне терапии LGG^® (10¹⁰ КОЕ/сут, лиофилизированный порошок, смешанный с жидким вишневым желатином). Лечение было наиболее эффективным у детей, находившихся на искусственном вскармливании. В то же время продолжительный прием молока, содержавшего LGG^® (10⁸ КОЕ/сут), не оказал значимого влияния на распространенность гастроинтестинальных симптомов у детей, посещавших детские дошкольные учреждения в Финляндии. Необходимо отметить, что в этом не­удачном исследовании использовался препарат с более низкой (в 100 раз) суточной концентрацией, хотя другие факторы (состав пробиотического продукта, гетерогенность предметов исследования) также могли сыграть значимую роль. Недавно опубликованный метаанализ доказал, что терапия LGG^® может уменьшить частоту возникновения и интенсивность болевого синдрома у детей, страдающих заболеваниями, течение которых сопровождается появлением абдоминальной боли, особенно у детей с синдромом раздраженного кишечника. Необходимо отметить, что клинический эффект хотя и являлся статистически значимым, однако был не очень выраженным, что не стало неожиданностью для ученых, принявших во внимание значительную гетерогенность среди больных с таким синдромом.
При других заболеваниях эффекты LGG^® изучены гораздо лучше. В рамках рандомизированного исследования доказано, что пероральный прием LGG^® (6×10⁹ КОЕ в грудном молоке) предотвращает колонизацию кишечника штаммами Candida у недоношенных детей; основополагающие механизмы нуждаются в дальнейшем изучении. Два пилотных исследования продемонстрировали много­обе­щающие результаты применения LGG^® (соответственно, 1010 КОЕ в обезжиренном молоке и 1,2×10⁹ КОЕ в лиофилизированном порошке ежедневно) при рецидивирующем колите у детей, вызванном Clostridium difficile; эти результаты необходимо повторить в более широкомасштабных исследованиях. В двойном слепом рандомизированном плацебо-контролируемом исследовании доказано, что назначение пациентам с патологией почек коммерческого йогурта, содержащего LGG^®, в течение 8 недель способствует элиминации ванкомицин-резистентных энтерококков у всех участников. В другом широко­масштабном одностороннем слепом рандомизированном плацебо-­контролируемом исследовании, проведенном с учас­тием детей, которым назначался LGG^® (3×10⁹ КОЕ/сут, ­растворенный в воде или молоке) или плацебо, достоверные различия между основной и контрольной группами зафиксированы только после 3 недель терапии. Механизм элиминации ванкомицин-резистентных энтеро­кокков еще предстоит изучить, но SpaCBA фимбрии LGG^® имеют опре­деленную идентичную последовательность (­30-40%) с фимбриями Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium.

Возможные эффекты в других нишах организма
Несмотря на то что многие интервенционные исследования направлены на изучение влияния LGG^® на желудочно-кишечный тракт, большой интерес представляет определение внекишечных свойств этого пробиотика. Было доказано, что прием LGG^® с йогуртом, молоком, леденцами уменьшает количество Streptococcus mutans (бактерий, способствующих развитию кариеса) в ротовой полости. Очень длительное употребление молока, содержащего LGG^® (5-10×10⁵ КОЕ), ­по-видимому, уменьшает вероятность развития кариеса у детей. Следует отметить, что влияние кратковременного приема LGG^® (4×10⁸ КОЕ/сут) на ацидогенность пятен и образование кариеса у взрослых не доказано, хотя в этом исследовании LGG^® принимали в таблетках, которые могли быть не самой лучшей формой выпуска. Следует подчеркнуть, что LGG^® не ферментирует сахарозу в значимом количестве, т. е. сам по себе этот пробиотический штамм не является ­кариесогенным (данное свойство иногда ­приписывают лактобациллам из-за продукции молочной кислоты).
Другие авторы изучали влияние LGG^® на состояние респираторной системы. Например, Hojsak и соавт. доказали, что ферментированное молоко, содержащее LGG^®, эффективно уменьшало риск развития инфекционных заболеваний органов дыхания (ИЗОД), длившихся >3 дней, у госпитализированных детей. Кроме того, у недоношенных детей, ежедневно получавших капсулы LGG^® (109 КОЕ) начиная с первой недели после рождения, отмечено достоверное ­снижение распространенности ИЗОД и эпизодов ­риновирусной инфекции в течение первых 2 мес жизни. Установлено, что капсулы LGG^® (109 КОЕ) защищают госпитализированных пациентов от развития вентилятор-­ассоциированной пневмонии, особенно вызванной грамотрицательными патогенами, такими как Pseudomonas aeruginosa. Дли­тельная терапия LGG^® (6×10⁹ КОЕ/сут, пер­оральный регидратационный раствор) больных муковисцидозом, инфицированных P. aeruginosa, способствовала уменьшению распространенности обострений заболеваний легких и увеличению массы тела. К сожалению, в этом исследовании не изучался статус инфицирования P. aeruginosa после окончания приема LGG^®. Очевидно, эта область требует дальнейшего изучения, поскольку весьма вероятно, что именно комбинация антипатогенных и иммунорегуляторных свойств LGG^® определяет его потенциал в лечении ИЗОД.

Аллергические заболевания
Потенциальное иммуномодулирующее действие LGG^®, которому до сих пор уделялось большое внимание, включает широко обсуждаемое влияние на аллергические заболевания. В исследовании, результаты которого были опубликованы в журнале The Lancet, Kalliomаki и соавт. доказали, что пренатальный прием LGG® (10¹⁰ КОЕ/сут в капсулах или в воде) беременными (2-4 недели) в сочетании с постнатальным употреблением этого пробиотика детьми (6 мес) из семей с отягощенным анамнезом по атопическим заболеваниям достоверно снижает риск развития экземы у детей в возрасте 2, 4 и 7 лет. Однако в группе, получавшей LGG^®, отмечалась тенденция к увеличению распространенности аллергического ринита и бронхиальной астмы, тогда как статистически достоверные отличия в распространенности аллергии на коровье молоко отсутствовали. К сожалению, Kopp и соавт. не смогли подтвердить профилактическое действие LGG^® в отношении экземы, даже используя аналогичный протокол и концентрацию препарата. Причина получения столь разных результатов в настоящее время неизвестна, но считается, что генетические различия обследуемых популяций (финны vs немцы) могли сыграть в этом значительную роль. Кроме того, в немецкое исследование было включено большее количество младенцев вместе с их старшими родными братьями и сес­трами, что также могло повлиять на результаты. Вероятно, в исследованиях использовались различные пробиотические продукты; нельзя также исключить различия в технологии изготовления пробиотических препаратов, в том числе наличие фимбрий.
Что касается пищевой аллергии, то, как сообщалось ранее, прием детьми грудного возраста с аллергией на коровье молоко капсул LGG^® (5×10⁹ КОЕ) приводит к усилению продукции интерферона-γ стимулированными мононуклеарными клетками периферической крови, что, возможно, обеспечивает возникновение благоприятных ТН₁-иммуно­модули­рующих сигналов. Действительно, дети грудного возраста становились более толерантными к воздействию пероральных аллергенов в случае, если им назначалась гидролизированная казеиновая смесь в сочетании с LGG^® (10⁷ КОЕ / 100 мл смеси), по сравнению с детьми, получавшими только искусственную смесь. Прием LGG^® (2,6×10⁸ КОЕ ежедневно в молоке) взрослыми, гиперчувствительными к коровьему молоку, способствовал сни­жению активности иммуновоспалительного ответа посредством уменьшения экспрессии специфических рецепторов, таких как рецепторы комплемента CR1 и CR3.

Выводы
Является ли LGG^® лучшим пробиотическим штаммом на фармацевтическом рынке по сравнению с другими пробио­тиками? Вопрос трудный, поскольку ответ на него в значительной мере обусловлен ответом организма хозяина, которому назначен этот препарат. Как указывалось ранее, ответ организма хозяина зависит от комбинации различных бакте­риальных эффекторов, включая патоген-­ассоциированный моле­кулярный паттерн, взаимодействующий с патоген-­распознающими рецепторами.
Эффективность терапии, вероятно, зависит от дозы, фазы роста, состава препарата, времени приема, длительности терапии, возраста и генетических особенностей субъектов, а также других переменных. Одним из очевидных преимуществ LGG^® является то, что этот пробиотик хорошо изучен, широко применяется и имеет очень высокий профиль безопасности. LGG^® используют более чем в 40 странах мира, но особенно популярен он в Финляндии (годовое потребление на душу населения в 2000 г. составляло 6 л). Одним из доказательств безопасности LGG^® является тот факт, что, несмотря на увеличение потребления LGG^® в Финляндии и Швеции, уровень бактериемии Lactobacillus в этих странах остался неизменным. Использование LGG^® в различных клинических исследованиях без развития серьезных нежелательных явлений также подтверждает безопасность препарата. По данным разных авторов, LGG® назначался новорожденным с низкой массой тела при рождении, беременным женщинам, ВИЧ-инфици­рованным пациентам и больным, находившимся на аппарате искусственной вентиляции легких.
В целом данные уже опубликованных различных клиничес­ких исследований LGG^®, независимо от их результатов, могут помочь в разработке дизайна новых испытаний, тогда как данные последних молекулярных исследований генов и молекул LGG^® способны значительно улучшить понимание их пробиотической функции. Все это позволит повысить достоверность клинических исследований и обосновать потенциальные механизмы действия, что наряду с продолжающимся развитием «омик»-технологий (метагеномики, транскриптомики, метаболомики, детальным секвенированием спонтанных мутаций LGG^®) даст возможность контролировать эффективность терапии LGG^® и лучше понять пациентов, ответивших и не ответивших на лечение.

Статья печатается в сокращении.

Microbial Cell Factories 2014, 13 (Suppl 1): S7

Перевела с англ. Татьяна Можина