Зонд, активируемый нуклеазой, обнаруживает циркулирующие опухолевые клетки при раке молочной железы

22.10.2017


Одной из основных проблем при разработке диагностических тестов, направленных на выявление в крови циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК), является создание метода, легкого в эксплуатации, достаточно чувствительного и способного учитывать молекулярную гетерогенность ЦОК. 

К преимуществам нуклеаз как биомаркеров ЦОК относятся их повышенная экспрессия многими раковыми клетками, включая клетки, вовлеченные в метастазирование, и ферментативная активность, которая может быть использована для амплификации сигнала в методах обнаружения.

15 сентября S. Kruspe и соавт. опубликовали данные о том, как преодолеть многие ограничения, свойственные существующим видам тестов на обнаружение ЦОК, путем разработки химически модифицированных зондов, активируемых нуклеазой, – NucAP.

Преимуществами этого анализа являются быстрота, высокая чувствительность и простота выполнения. Его этапы включают: захват раковых клеток, который проводится при помощи микрофильтрации (SCREENCELL), лизис этих клеток с использованием буфера для расщепления нуклеазы, содержащего нуклеазные зонды, и обнаружение сигнала с использованием стандартной флюорометрии (рис.).

Задача, с которой столкнулись авторы, заключалась в разработке химически модифицированных зондов, способных к быстрому и надежному обнаружению нуклеаз, сверхэкспрессируемых раковыми клетками, несмотря на наличие в крови эндогенных нецелевых нуклеаз. Для увеличения специфичности были использованы нуклеотидные модификации, которые обеспечили восприимчивость исключительно к нуклеазам, экспрессируемым в клетках рака молочной железы (РМЖ).

Установлено, что эта методика позволяет эффективно обнаруживать опухолевые клетки в крови пациенток с РМЖ на IV стадии (~96% истинноположительных результатов, ~ 15% – ложно-положительных). При уровне заболеваемости 2% положительное прогностическое значение этого анализа составляет 11,9% и указывает на высокую вероятность ложноположительного результата. То есть анализ не является оптимальным скрининговым тестом в общей популяции, но обеспечивает выявление женщин с высоким риском развития метастатического РМЖ.

Новая методика в перспективе может быть реализована как надежный диагностический инструмент при РМЖ. Поскольку увеличение экспрессии нуклеаз свойственно многим видам рака, технология может быть легко применима и при других видах рака, нуждающихся в улучшенных диагностических возможностях, включая рак поджелудочной железы, легкого и яичника.

Kruspe S. et al. Rapid and sensitive detection of breast cancer cells in patient blood with nuclease-activated probe technology. Mol Ther Nucleic Acids, 2017.

Перевела с англ. Екатерина Марушко

Спеціальний випуск тематичного номеру газети «Здоров’я України» «Онкологія, гематологія, хіміотерапія» 2017 р.

НОВИНИ ЗА ТЕМОЮ Онкологія та гематологія

Тривале застосування деяких гормональних препаратів може бути причиною підвищеного ризику розвитку пухлин мозку 28.03.2024 Акушерство/гінекологія Онкологія та гематологія Тривале застосування деяких гормональних препаратів може бути причиною підвищеного ризику розвитку пухлин мозку

Як виявило дослідження у Франції, тривале застосування деяких прогестагенних гормональних препаратів спричиняє підвищений ризик розвитку типу пухлини мозку, відомого як внутрішньочерепна менінгіома. Учені зазначають, що це перша робота, яка оцінює ризик, пов’язаний із прогестагенами, які використовують мільйони жінок у всьому світі, тому необхідні подальші дослідження, аби краще зрозуміти цей ризик. Гестагени подібні до природного гормону прогестерону, який широко застосовується для лікування гінекологічних захворювань, таких як ендометріоз і синдром полікістозних яєчників, а також при гормональній терапії в період менопаузи та для оральної контрацепції. ...

20.03.2024 Діагностика Онкологія та гематологія Рівень циркулюючої пухлинної ДНК – предиктор успішності лікування раку стравоходу

Моніторинг рівня ДНК, що виділяється пухлинами та циркулює у крові, може допомогти лікарям точно оцінити, як гастроезофагеальний рак реагує на лікування, і потенційно передбачити майбутній прогноз, свідчить нове дослідження під керівництвом співробітників Комплексного онкологічного центру Сідні Кіммела при Університеті Джона Гопкінса в Балтіморі (штат Меріленд, США). Науковці відстежували кількість пухлинних клітин, що залишилися після лікування, аналізуючи циркулюючу ДНК пухлини (ctDNA) і досліджуючи, як ці показники можуть надати цінну інформацію про результати лікування. Було виявлено, що відсутність ctDNA відбувається разом зі специфічною активацією Т-клітин, які є частиною імунної системи розпізнавання та боротьби з раком. ...

15.03.2024 Онкологія та гематологія Дослідники розробляють подвійну протипухлинну вакцину

Дослідницька група медичного факультету Університету Гонконгу виявила, що екзосоми, отримані з γδ-T-клітин, не лише мають пряму протипухлинну дію, але також, будучи розробленими у вигляді вакцини, можуть ефективно індукувати пухлиноспецифічну імунну відповідь. Висновки, які забезпечують новий підхід до лікування раку, були опубліковані в Journal of Extracellular Vesicles....